經(jīng)常制備單細胞懸液的科研人員常會(huì )遇到這樣的困擾:即便嚴格遵循既定步驟操作,制備出的單細胞懸液活率卻依舊偏低,這背后究竟隱藏著(zhù)哪些不為人知的原因呢?
相關(guān)原因介紹
01、酶的影響
用不同消化酶制備單細胞,活率是不同的。如果酶的消化能力較低,容易消化不充分,殘留的細胞團會(huì )影響細胞活性;如果酶的消化能力很強,容易消化過(guò)度,損傷細胞膜,造成細胞活率偏低,因此,合適的消化酶至關(guān)重要。
02、時(shí)間把控
細胞離體時(shí)間越久,死亡率越高,找到合適的酶,短時(shí)間內制備好,細胞活率較高;時(shí)間過(guò)短時(shí),組織還沒(méi)消化好,活率也是不佳的,要探究合適的消化時(shí)間。
03、樣本取材
①組織類(lèi)型:神經(jīng)、胰腺等一些組織細胞間連接緊密,細胞脆弱,分離時(shí)易受損,如果組織受損,盡量避開(kāi)損傷部位取材。
②組織處理:組織血液較多時(shí),要多次清洗,洗掉表面粘連的紅細胞;組織本身血液較多時(shí),做完后要裂紅,避免紅細胞碎片影響細胞活率。
③樣本保存與運輸:保存時(shí)間過(guò)長(cháng)、溫度不適或運輸過(guò)程震蕩等,會(huì )使細胞缺氧、代謝異常,活性下降。
04、操作環(huán)境與人為因素
①無(wú)菌操作:操作過(guò)程中微生物污染,會(huì )與細胞競爭營(yíng)養、產(chǎn)生毒素,導致細胞死亡。
②操作熟練度:操作人員技術(shù)不熟練,增加細胞在體外的暴露時(shí)間,使細胞活性受損。
上海凈信的單細胞懸液制備儀,可有效避免以上原因,搭配專(zhuān)屬的消化酶試劑盒,能夠根據不同的實(shí)驗需求精準選擇最適宜的消化酶。簡(jiǎn)化了操作步驟,操作簡(jiǎn)單,每一款儀器都經(jīng)過(guò)大量的實(shí)驗驗證,精準匹配最佳程序,顯而易見(jiàn)的提升制備的單細胞活率與得率,提高實(shí)驗的整體效率。
案例展示
案例一:
小鼠脾臟單細胞懸液制備
臺盼藍染色、細胞計數儀計數
細胞活率99%
小鼠脾臟
案例二:
小鼠肺單細胞懸液制備
PI染色,流式分析結果
細胞活率98.67%
小鼠肺
案例三:
小鼠肝單細胞活率
臺盼藍染色,細胞計數儀局部圖片
小鼠肝
案例四:
小鼠胰腺單細胞懸液
細胞計數儀檢測報告
小鼠胰腺
儀器展示
上海凈信現有JX-DLDXB和JX-CKSM兩款儀器可供選擇。JX-DLDXB款專(zhuān)為處理量大的實(shí)驗場(chǎng)景設計,其每個(gè)管道均可獨立運行,輕松應對大規模的單細胞制備任務(wù);而JX-CKSM款則完美契合臨床穿刺等特殊實(shí)驗需求,雖然每管處理量相對較少,但卻能實(shí)現高效的批量處理,為單細胞制備提供強大助力。