圖片來(lái)源于網(wǎng)絡(luò )如果侵權請聯(lián)系作者

流式細胞術(shù)做為一種快速的細胞定量分析技術(shù)，能夠同時(shí)對單個(gè)細胞進(jìn)行多種特征參數的檢測，如細胞大小、DNA含量、蛋白質(zhì)表達等，現已成為科研領(lǐng)域中不可或缺的重要工具。

流式檢測能順利進(jìn)行的硬要求之一是，樣本必須能在鞘液中流動(dòng)，因此，無(wú)論是培養的細胞，還是從各種組織中提取出來(lái)的細胞，都需要把待測樣本制備成單細胞懸液!制備欠妥的樣本，不僅會(huì )直接影響實(shí)驗的準確性和結果的可靠性，一些大的細胞團塊甚至會(huì )堵塞液流系統而影響儀器的正常運行。

實(shí)驗過(guò)程

1、取脾臟

頸椎脫臼法處死小鼠;在解剖臺上固定小鼠，從底端小心剪開(kāi)小鼠整個(gè)腹部皮膚，暴露出小鼠腹膜;剪開(kāi)小鼠腹膜，暴露出脾臟，摘取，并充分去除上面的脂肪組織;將取下的脾臟剪碎，置于預冷的PBS中浸泡待用

2、制備單細胞

使用凈信單細胞懸液制備儀，設置參數，點(diǎn)擊啟動(dòng)，程序結束后加入終止液

3、裂解紅細胞

在離心后的細胞懸液中加入ACK紅細胞裂解液，重懸細胞，在室溫裂解5min

4、過(guò)濾洗滌

通過(guò)過(guò)濾網(wǎng)過(guò)濾，將過(guò)濾后的細胞懸液收集至離心管中，離心5min，去除上清液

5、單細胞計數

顯微鏡觀(guān)察細胞，使用染色緩沖液重懸細胞調整細胞濃度，吸取細胞懸液至流式管中，準備染色

結果分析：

小鼠脾臟活率99%，方便后續進(jìn)行流式分析。

注意事項：

1.組織盡量剪碎，消化效果更好

2.摘取脾臟后，盡可能移除黏連的脂肪組織，提高脾臟細胞的占比

3.建議使用新鮮配制的紅細胞裂解液

4.消化后的細胞應洗滌干凈，否則影響流式效果

單細胞懸液制備儀不僅效率高、溫和，保護細胞活性，還精準可控，適應不同組織類(lèi)型。高通量設計，提升實(shí)驗效率，對于需要處理多個(gè)樣本的研究項目，單細胞懸液制備儀的高通量設計可以同時(shí)處理多個(gè)樣本，大幅縮短實(shí)驗時(shí)間。選擇合適的儀器，可批量制備單細胞懸液，節約了實(shí)驗時(shí)間，根據需求選擇儀器中人體、小鼠各個(gè)組織、器官對應程序，提高了單細胞懸液制備的活率和得率，使后續實(shí)驗進(jìn)行更加順利。