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在分子生物學(xué)研究中,核酸提取是實(shí)驗成功的關(guān)鍵第一步。動(dòng)植物樣本(如植物葉片、動(dòng)物組織、微生物等)通常具有復雜的細胞壁或細胞膜結構,傳統研磨方法存在效率低、樣品易降解、交叉污染等問(wèn)題。尤其對富含纖維或油脂的樣本,常規液氮研磨耗時(shí)耗力,且高溫易導致核酸斷裂。而冷凍研磨儀通過(guò)低溫破碎技術(shù),可實(shí)現樣本的快速均質(zhì)化,為下游實(shí)驗提供高質(zhì)量核酸。
實(shí)驗原理:
冷凍研磨儀的核心原理是低溫物理破碎
低溫保護:通過(guò)預冷或液氮速凍,使樣本在-196℃至-50℃環(huán)境下瞬時(shí)固化,抑制核酸酶活性,防止核酸降解。
高頻振動(dòng)破碎:研磨珠在儀器驅動(dòng)下高頻撞擊樣本,通過(guò)物理剪切力快速打破細胞壁/膜,釋放核酸。
均質(zhì)化處理:適配不同體積的研磨管,確保樣本破碎均勻,避免批次差異。
實(shí)驗案例分享(以植物葉片RNA提取為例)
植物葉片RNA提取流程圖
樣本預處理:
取新鮮植物葉片,液氮速凍后剪碎;加入研磨珠及適量裂解緩沖液。
設備參數設置:
預冷研磨儀至-50℃;,設置研磨頻率,啟動(dòng)研磨。
樣品收集:
離心(12.000 rpm,5分鐘)取上清。
純化:
按常規試劑盒步驟進(jìn)行核酸純化即可得到植物RNA。
后續分析
研磨后的樣本可直接用于核酸質(zhì)量檢測:Nanodrop測定A260/A280比值(理想值1.8-2.0),瓊脂糖凝膠電泳觀(guān)察DNA/RNA完整性;下游應用:PCR擴增、基因測序、轉錄組分析等。
DNA溶液真空離心濃縮儀實(shí)驗步驟分享:
1.樣本準備:將含有DNA的溶液加入真空離心濃縮儀的樣品管中。
2.濃縮過(guò)程:啟動(dòng)儀器,在真空和離心力的共同作用下,溶液中的溶劑迅速蒸發(fā),DNA被濃縮在樣品管底部。
3.樣本回收:濃縮完成后,關(guān)閉儀器,取出樣品管,用適量緩沖液重懸DNA,即可用于后續檢測。
4.后續分析:
研磨后的樣本可直接用于核酸質(zhì)量檢測:Nanodrop測定A260/A280比值(理想值1.8-2.0),瓊脂糖凝膠電泳觀(guān)察DNA/RNA完整性;下游應用:PCR擴增、基因測序、轉錄組分析等。
注意事項:
液氮操作需佩戴防凍手套;
研磨管裝載需對稱(chēng)平衡,避免儀器震動(dòng)異常。
防污染管理:每次實(shí)驗后擦拭研磨倉;
不同樣本批次間更換研磨珠或高壓滅菌處理。
為什么選擇凈信冷凍研磨儀?
效率提升:幾分鐘完成傳統方法30分鐘的工作量;
得率提高:低溫環(huán)境最大程度保護核酸完整性;
冷凍研磨儀 JXFSTPRP-CLN
支持多樣化樣本:適配昆蟲(chóng)外骨骼、骨骼、真菌孢子等特殊樣本。
冷凍研磨儀不僅是實(shí)驗室的"樣本破碎專(zhuān)家",更是保證數據可靠性的一道防線(xiàn)。從基礎科研到臨床檢測,它正以革命性的技術(shù)推動(dòng)生命科學(xué)研究的精準化進(jìn)程。